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一文讀懂不同活性氧檢測試劑盒的工作原理

更新時間:2025-11-17點擊次數:121
   不同活性氧檢測試劑盒基于不同的檢測原理,各有其特點和適用范圍。在實際應用中,需要根據實驗目的、樣本類型以及檢測條件等因素綜合考慮,選擇合適的試劑盒,以準確檢測活性氧水平,為相關研究提供可靠的數據支持。活性氧(ROS)是生物體內一類具有高活性的含氧化合物,包括超氧陰離子、過氧化氫、羥基自由基等。它們在細胞信號傳導、免疫防御等生理過程中發揮重要作用,但過量產生會導致氧化應激,損傷細胞成分,與多種疾病的發生發展密切相關。因此,準確檢測活性氧水平對研究細胞生理病理機制意義重大,而活性氧檢測試劑盒就是常用的檢測工具,不同試劑盒工作原理有所不同。
 
  化學發光法檢測試劑盒
 
  這類試劑盒主要基于活性氧與特定化學發光物質發生反應產生光子的原理。例如,常見的魯米諾在活性氧(如過氧化氫,在辣根過氧化物酶的催化下)作用下,會發生氧化反應,反應過程中產生激發態的中間體,當這些中間體回到基態時,就會釋放出光子。通過檢測光子的強度,就可以間接反映活性氧的含量。光子強度與活性氧的濃度在一定范圍內成正比,利用專門的發光檢測儀器測量光子信號,經過標準曲線校準后就能確定樣本中活性氧的水平。
 
  熒光法檢測試劑盒
 
  熒光法是應用較為廣泛的檢測方式。其原理是利用能與活性氧特異性結合的熒光探針。這些探針本身沒有熒光或者熒光較弱,當與活性氧發生反應后,探針的化學結構發生改變,從而產生熒光或者熒光強度發生變化。比如,二氯二氫熒光素二乙酯(DCFH-DAE)是一種常用的檢測活性氧的熒光探針,它本身無熒光,進入細胞后被細胞內的酯酶水解成DCFH,DCFH無熒光,但可被活性氧氧化成熒光物質DCF,熒光強度與活性氧的量相關。通過熒光顯微鏡、流式細胞儀或熒光分光光度計等設備檢測熒光信號的強弱,進而對活性氧進行定量或定性分析。
 
  比色法檢測試劑盒
 
  比色法檢測試劑盒依據活性氧與特定顯色劑反應產生顏色變化的特性來檢測。當活性氧與顯色劑作用時,會使顯色劑的顏色發生深淺變化,這種顏色變化與活性氧的含量存在對應關系。例如,某些試劑盒中的顯色劑在與過氧化氫反應后,會生成有色產物,通過使用分光光度計測量溶液在特定波長下的吸光度,再根據預先繪制的標準曲線,就可以計算出樣本中活性氧的濃度。這種方法操作相對簡單,不需要昂貴的檢測設備,適合一些對檢測條件要求不高的場合。